【JD-XC1】【松材線蟲檢測儀設(shè)備選競道科技，野外快檢系統(tǒng)可便攜移動(dòng)作業(yè)，自動(dòng)顯示檢測結(jié)果并打印檢測報(bào)告，操作更智能，廠家直發(fā)，包教包會(huì)，歡迎詢價(jià)!】。

　　一、 檢測前準(zhǔn)備

　　環(huán)境與設(shè)備準(zhǔn)備

　　野外操作選擇陰涼無風(fēng)處，溫度控制在 15–35℃;實(shí)驗(yàn)室操作需清潔工作臺(tái)，避免核酸污染。

　　取出檢測儀，開機(jī)預(yù)熱 10 分鐘，同時(shí)檢查電量(續(xù)航需≥2 小時(shí))或外接穩(wěn)定電源。

　　耗材與試劑準(zhǔn)備

　　核對耗材：預(yù)制擴(kuò)增試劑卡、樣本裂解液、一次性研磨管、移液器、濾芯吸頭、無酶離心管。

　　試劑復(fù)溫：將冷藏的預(yù)制試劑卡常溫放置 10 分鐘，避免溫差導(dǎo)致試劑失效;確認(rèn)裂解液無渾濁、無沉淀。

　　準(zhǔn)備對照：每批次需設(shè)置陰性對照(健康松木樣本)和陽性對照(松材線蟲標(biāo)準(zhǔn) DNA 樣本)。

　　二、 樣本前處理(5–10 分鐘)

　　取樣：從疑似病木的病健交界處，剪取 1–2g 木屑或木段，放入一次性研磨管。

　　裂解釋放核酸

　　向研磨管中加入 500μL 裂解液，擰緊蓋子后劇烈震蕩 1 分鐘，或用檢測儀配套超聲模塊處理 30 秒。

　　水浴加熱：沸水浴 5 分鐘(野外可用便攜式沸水器)，取出后靜置冷卻至室溫。

　　上清液制備：10000rpm 離心 1 分鐘(無離心機(jī)可靜置 2 分鐘取上清)，吸取 100μL 上清液至新的無酶離心管，作為待測樣本液。

　　三、 加樣與上機(jī)檢測(10–15 分鐘)

　　加樣操作

　　撕開預(yù)制試劑卡封口膜，用移液器吸取 20μL 待測樣本液，緩慢加入試劑卡反應(yīng)孔中，避免產(chǎn)生氣泡。

　　同時(shí)向陰性對照、陽性對照的試劑卡中，分別加入 20μL 陰性樣本液、陽性標(biāo)準(zhǔn)液。

　　輕彈試劑卡側(cè)壁，確保液體與凍干試劑充分混合，蓋上密封蓋防止污染。

　　上機(jī)設(shè)置

　　將試劑卡放入檢測儀卡槽，關(guān)閉艙門，在觸屏界面選擇松材線蟲檢測程序。

　　設(shè)置參數(shù)：等溫?cái)U(kuò)增溫度(LAMP 法 63℃、RPA 法 39℃)，反應(yīng)時(shí)間 20 分鐘，點(diǎn)擊 “開始檢測"。

　　四、 結(jié)果判讀與數(shù)據(jù)管理(5 分鐘)

　　結(jié)果查看

　　反應(yīng)結(jié)束后，檢測儀自動(dòng)生成檢測結(jié)果：熒光通道法以曲線出現(xiàn)明顯指數(shù)增長為陽性;層析試紙條法以檢測線(T 線)和質(zhì)控線(C 線)雙條帶為陽性，僅 C 線為陰性，無條帶為檢測無效。

　　判讀標(biāo)準(zhǔn)：陽性對照需顯陽性、陰性對照需顯陰性，否則本次檢測結(jié)果無效。

　　數(shù)據(jù)保存與上傳

　　點(diǎn)擊 “保存數(shù)據(jù)"，記錄樣本編號、檢測時(shí)間、采樣地點(diǎn)等信息;支持藍(lán)牙 / 4G 上傳至林業(yè)檢疫平臺(tái)。

　　導(dǎo)出檢測報(bào)告，打印后存檔備案。

　　五、 后續(xù)清理與注意事項(xiàng)

　　取出試劑卡，按生物安全要求裝入密封袋，帶回實(shí)驗(yàn)室集中處理，禁止野外丟棄。

　　用 75% 酒精擦拭檢測儀卡槽與表面，關(guān)閉電源;移液器、研磨管等耗材按醫(yī)療廢物處理。

　　檢測異常樣本需重復(fù)檢測，仍為陽性的需送實(shí)驗(yàn)室用熒光定量 PCR 確證。